Genemore 生物素化试剂

生物素化标记是最流行的标记方法之一，被广泛用于酶联免疫，EMSA，生物膜干涉技术等相互作用检测。该试剂盒中的生物素试剂主要是基于氨基的生物素化，即将生物素共价偶联在目标物质的氨基上（-NH2）。以蛋白质为例，如下图所示

在生物素标记完成后，用凝胶层析方法(脱盐柱)去除分子量较小的未反应的生物素化试剂，并收集标记完成的大分子。

本试剂盒包含一管20ul的10mM生物素化试剂和一个脱盐柱(截留分子量为5000Da)。

适用范围：带有氨基的物质的生物素化和纯化。

◎ 使用简单易操作

生物素化过程在1个小时内完成，不需要特别的仪器辅助

◎ 可多次使用

可以使用20次以上

◎ 严格的质量把控

用生物膜干涉技术严格质控，保证生物素化的效率以及生物素修饰后分子的活性。

1.为什么生物素化标记的效率很低？

a)多余的生物素化试剂未脱干净，可能需要透析或者再次过脱盐柱去除游离生物素。

b)生物素化前的目标物浓度过低。

c)样品中其他物质含有氨基，将其他含有氨基的物质去除，再进行生物素标记。

2.如果我的分子小于5000Da,怎么进行生物素化？

可以将摩尔比5-10倍的目标物和生物素化试剂混合，可能可以确保生物素化试剂完全反应，则不需要通过脱盐柱去除未反应的生物素化试剂。

3.生物素化试剂可以使用几次？脱盐柱可以重复使用几次？

20ul的生物素化试剂一般可以使用10-20次。原则上，脱盐柱可以使用无数次。但是如果发现流速变慢，可以意味着脱盐柱需要更换。

4.生物素化的目标物的要求是什么？

待生物素标记的目标物质。

•浓度100ug/ml以上,50-100ul。

•目标物纯度建议在90%以上。

•缓冲液中除了目标物外不得含有其他任何带有氨基的物质（如Tris，载体蛋白等）如果有，必须通过脱盐或者透析等方法去除。

•如果需要用脱盐柱去除未反应的生物素化试剂，分子量需要大于5000Da