产品介绍：

DL- Nuclear Fix/Perm Kit主要应用于对转录因子、核蛋白、细胞因子和趋化因子进行核内染色，可固定细胞并透化细胞核核膜，进而对核内蛋白质进行染色。Nuclear-Perm/Wash Buffer经过反复优化，可最大程度地减少非特异性染色并最大化特异性荧光信号强度。

产品信息：

试剂配制：

   Fix/Perm工作液（1X）：将1体积Fix/Perm Concentrate (2X)加入1体积的Fix/Perm Diluent，如将1ml Fix/Perm Concentrate (2X) 加入1ml的Fix/Perm Diluent，配制成2ml的Fix/Perm工作液，使用前新鲜配制。

    N-Perm/Wash Buffer工作液（1X）：将1体积N-Perm/Wash Buffer (10X)加入9体积的去离子水，如将1ml N-Perm/Wash Buffer (10X) 加入9ml的去离子水，配制成10ml的1X N-Perm/Wash Buffer，1X N-Perm/Wash Buffer可保存在4℃并于一周内使用

使用说明：

请详细阅读使用说明后再开始相关实验。

表面染色（可选）：收集细胞后，每管加入50ul表面染色缓冲液和适量体积的表面抗体，充分重悬细胞，4℃，避光孵育30 min后，加入500 ul表面染色缓冲液，300g×5min，4℃离心，弃去上清液；

使用涡旋振荡仪震荡细胞沉淀，使其松散。

向每管细胞中加入500ul Fix/Perm工作液，充分重悬细胞，2-8°C避光孵育30分钟；

    注：建议细胞密度不高于10^7/ml。

向每管细胞中添加1ml N-Perm/Wash Buffer工作液；

600g×5 min离心，4℃，弃去上清液；

每管加入100ul 1X N-Perm/Wash Buffer工作液和适量体积的胞内抗体，充分重悬细胞；

2-8°C避光孵育1h以上或过夜；

向每管细胞中添加1ml N-Perm/Wash Buffer工作液，洗去未结合抗体，600g×5 min离心，4℃，弃去上清液；

重复洗涤一次。

将细胞重悬于300-500ul N-Perm/Wash Buffer工作液进行上机分析。

注：在室温下保存时，样品应在2小时内进行上机分析；在2-8°C下保存时，应在24小时内分析样品

常见问题及提示：

Fix/Perm Diluent与N-Perm Wash Buffer (10X)的颜色因批次而异，并且可能包含可见的沉淀，这不会影响产品的性能。

本品不适用于磷酸化核内抗原的检测。

用户需根据不同细胞的要求在核内染色之前预处理细胞。

一些试剂包含甲醛和叠氮化钠，请穿戴实验防护服、手套、口罩等必要的防护装备。