生物素化标记是最流行的标记方法之一，被广泛用于酶联免疫，EMSA,生物   膜干涉技术等相互作用检测。该试剂盒中的生物素试剂主要是基于氨基的生物素化，即将生物素共价偶联在目标物质的氨基上(-NH2)。以蛋白质为例，如下图所示

        在生物素标记完成后，用凝胶层析方法(脱盐柱)去除分子量较小的未反应的生物素化试剂，并收集标记完成的大分子。

       本试剂盒包含一管20ul的10mM生物素化试剂和一个脱盐柱(截留分子量为5000Da)。

       适用范围：带有氨基的物质的生物素化和纯化，

1.为什么生物素化标记的效率很低?

a)多余的生物素化试剂未脱干净，可能需要透析或者再次过脱盐柱去除游离生物素。

b)生物素化前的目标物浓度过低。

c)样品中其他物质含有氨基，将其他含有氨基的物质去除，再进行生物素标记。

2.如果我的分子小于5000Da,怎么进行生物素化?

可以将摩尔比5-10倍的目标物和生物素化试剂混合，可能可以确保生物素化试剂完全反应，则不需要通过脱盐柱去除未反应的生物素化试剂。

3.生物素化试剂可以使用几次?脱盐柱可以重复使用几次?

20ul的生物素化试剂一般可以使用10-20次。原则上，脱盐柱可以使用无数次。但是如果发现流速变慢，可以意味着脱盐柱需要更换。

4.生物素化的目标物的要求是什么?

需要满足“实验试剂和耗材”中的“待生物素标记的目标物质”中列举的条件，并需要带有氨基。